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使用組織切片機切片不易,但該避的坑你不能不懂!

點擊次數:697 更新時間:2022-09-07
  病理實驗看似簡單,實際上稍不注意細節,使用組織切片機就會漏洞百出,不同組織如何保存?不同切片有何區別?刀法需要慢慢練,但該避的坑你不能不懂!
  
  今天遠湘生物匯總了那些關于組織切片機進行病理切片的問題,看小編如何搞定這些實驗難題。
  
  一、組織如何保存?
  
  普通病理用固定液(多聚甲醛)保存;免疫組化、免疫熒光實驗不宜固定時間太久。
  
  二、不同組織都用一個脫水流程嗎?
  
  不同組織,其結構不同,脫水流程也有是區別的
  
  三、石蠟包埋切片一般切的厚度是多少?冰凍切片切多厚?
  
  冰凍切片厚度為6-10um;石蠟切片為4-6um。
  
  四、冰切出現裂痕的原因?
  
  可能是防卷板沒放好,冷凍切片機的溫度一般是零下10到15℃;還有可能是你的組織比較硬或者是刀片的問題,不同組織切片機里也要不同溫度需要注意一下。
  
  五、為什么切片總是脫片?
  
  1、粘附劑因素在制作組織學和病理學石蠟切片時,一般用甘油蛋白做粘附劑,但若甘油蛋白配制的時間過長,蛋白質變性,甘油蛋白的粘附作用即降低,可導致組織切片與載玻片粘附不牢,切片一進入二甲苯溶液即從玻片上脫落下來。
  
  2、溫度的影響常規石蠟切片染色,溫度一般在20-37較好。組織從二甲苯脫蠟出來,立即進入室溫的純酒精清洗,這樣組織一下從37降至4℃左右,一冷一熱,熱脹冷縮,造成組織容易從載玻片上脫落下來。
  
  3、浸蠟時間的影響,組織取材后在脫水,浸蠟時間和包埋溫度上掌握不夠準確,特別是腺體組織比較嬌嫩,稍有過頭組織就變脆,在染色過程中就很容易出現脫片現象。
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